欧美人妻日韩精品,国产免费一区二区三区在线观看,国产情侣真实露脸在线 ,仑乱老女人在线观看

聯(lián)系電話 13632754400

當前位置:首頁  >  技術文章  >  液相色譜柱在使用時需要注意些什么?

液相色譜柱在使用時需要注意些什么?

更新時間:2021-11-08      點擊次數(shù):970
  關于液相色譜柱的使用注意事項,一般有以下幾點:
  1.加裝保護柱
  保護柱的作用是過濾掉來自流動相和樣品的化學“拉圾”同時也可以有效除去流動相和樣品中的不溶物。盡管現(xiàn)在的色譜儀在流動相吸入口、進樣閥后部以及在色譜柱的兩端都裝有1、2μm等不同孔徑的濾器,但濾器只能除去不溶性顆粒而不能除去化學污染,因此,加裝保護柱是必要的,特別是在分析中藥、中成藥等復雜混合物和生物樣品時更是保護分析柱不可少的措施。
  保護柱填料應與分析柱一致,粒徑可較分析柱大。保護柱屬消耗品,經過一定次數(shù)的樣品分析(50~100次)后,出現(xiàn)柱壓顯著升高或峰形變壞或基線漂移時,應考慮更換保護柱。
  2.過濾流動相和樣品
  流動相通常由水或緩沖溶液與有機溶劑混合而成,原則上,所有經過色譜柱的流動相均應過濾,但在實際操作上應視具體情況而有所區(qū)別:當有機溶劑用色譜純級,水用石英亞沸水或其它超純水時,在能確保水和有機溶劑的質量且沒有受到污染時,過濾并無更多實際意義。
  當流動相中含有緩沖鹽時,則過濾是必要的,如前所述,當緩沖溶液放置一段時間(視環(huán)境溫度不同而異,夏季一般不超過48 h,冬季一般不超過一周)后,在使用前還應重新過濾。
  所配制的樣品試液在注入流路系統(tǒng)前均要經0. 45μm ( 0. 22μm則更好)孔徑濾膜過濾。要注意區(qū)分水系和油系,二者不可混用,以防止濾膜溶解而造成污染。
  裝流動相的容器和色譜系統(tǒng)中的在線濾器要定期清洗和更換,以避免濾器因過載而起不到過濾作用。
  3.凈化樣品
  當樣品中含有對色譜柱有損害的化學成分,如產生吸附的蛋白質、糖等有機分子和強吸附性物質,以及可能對柱填料產生破壞作用的基團離子。在進樣前應盡可能對樣品進行分離提純以除去多余雜質組分。
  4.避免過高柱壓
  雖然高效液相色譜柱能耐受的壓力可達6000 p si (磅/平方英寸) ,但過高及過大的壓力變化均會縮短色譜柱的壽命,避免的方法是:
  (1)柱壓過高時,盡可能采用較小的流速,以不超過柱最大允許壓力的一半為宜。
  ( 2)當流速較大時,應采取流速梯度的辦法使流速分步到位。
  (3)使用手動進樣閥時,進樣閥的切換要盡可能的快。否則超過20%的壓力沖擊會很快使柱報廢。當使用多柱聯(lián)用時,柱切換要避免在高壓下進行。
  5.注意溫度和酸堿度
  一般以硅膠為基質的色譜柱最高使用溫度不超過60℃,以低于40℃為宜,特別是在流動相pH接近使用限度時,更應降低使用溫度。
  溫度過高會加快鍵合相的水解和硅膠的溶解,從而使填料性質改變,柱床塌陷,降低柱效,改變峰形。
  目前的鍵合硅膠色譜柱標示的pH適用范圍可達2~10,但在實際使用時應避免不正確的pH條件,特別是在偏堿性的條件(pH≥8)下使用 ,如必須要在正確的pH條件下使用時,可通過以下方法避免柱損害:
  (1)在泵和進樣閥之間加裝預柱(飽和柱)來飽和流動相
  (2)降低使用溫度
  (3)檢驗完畢后立即用與所使用的流動相互相混溶的“溫和溶劑”*清洗
  6.正確及時的沖洗
  開始試驗前,應了解柱中當前是何種溶劑。對于新液相色譜柱,如無特殊說明均為評價報告中所用流動相。柱中當前溶劑一定要與分析樣品所用流動相互溶,如不能混溶,要用與二者均能相互混溶的第三種溶劑過渡。