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先用正己烷-乙腈(99：1)以0.5ml/min的流速?zèng)_10倍柱體積，再依次以相同的流速相同的用量用氯仿、異丙醇、甲醇、甲醇-水(50：50)沖柱子。以0.5ml/min的流速用30倍柱體積的pH11.0的氫氧化鈉(LUNA)水溶液沖柱子(注意pH值切不可超過11.0)，立即用水(0.5ml/min的流速，30倍柱體積)沖洗，再換成流動(dòng)相。配制流動(dòng)相時(shí)，應(yīng)各組分分別量取，比例較小的組分要精密量取，需調(diào)pH值時(shí)要精密到0.1。反相條件下使用時(shí)，要特別注意控制pH值范圍，pH值越...

無論正在利用何種相互作用，液相柱色譜法都分六個(gè)步驟進(jìn)行：柱平衡樣品裝載洗滌洗脫清洗色譜柱再生一、柱平衡：大多數(shù)液相色譜方案從樹脂平衡步驟開始。與目標(biāo)蛋白質(zhì)和所選樹脂相容的緩沖液通過柱子。一種常見的做法是用5-10柱體積(CV)的平衡緩沖液平衡柱。例如，蛋白質(zhì)與疏水相互作用樹脂的結(jié)合在高離子強(qiáng)度下有效。在選擇平衡緩沖液時(shí)也要考慮目標(biāo)蛋白質(zhì)的特性，因?yàn)殡x子強(qiáng)度等緩沖液因素會(huì)受到蛋白質(zhì)穩(wěn)定性的限制；通常，人們會(huì)避免使用會(huì)使感興趣的蛋白質(zhì)變性或阻止其與固定相相互作用的平衡緩沖條件。二...

許多用戶對溶劑梯度洗脫分離后LC色譜柱應(yīng)該重新平衡多長時(shí)間有疑問。在這里，我們展示了對于反相和HILIC分離而言，再平衡周期短的令人滿意的結(jié)果。LC用戶通常會(huì)提出和討論關(guān)于在溶劑梯度洗脫分離后重新平衡LC色譜柱多長時(shí)間的問題。在本文中，我們根據(jù)最近對該主題的研究討論了細(xì)節(jié)，并表明即使對于HILIC分離，在兩個(gè)柱體積數(shù)量級(jí)的短再平衡周期內(nèi)也可以獲得令人滿意的結(jié)果。一、核心概念在溶劑梯度洗脫模式下使用LC時(shí)，必須有一段時(shí)間，通常是在分析結(jié)束時(shí)，在溶劑梯度的第一部分中使用的流動(dòng)相流...

高效液相色譜法是提取和純化甜味劑的可靠技術(shù)。在食品工業(yè)中被廣泛應(yīng)用；食品糖的甜味與蔗糖相似，熱量只有三分之二。這種五碳糖存在于許多植物中，但大多濃度較低（約1%），因此提取和純化成本很高。因此，迄今為止，食品糖主要通過化學(xué)方法生產(chǎn)，使用催化木糖脫氫。一、在木糖轉(zhuǎn)化中引入HPLC一種有吸引力的替代方法是通過發(fā)酵將生物質(zhì)（例如麥秸）中的木糖轉(zhuǎn)化為食品糖。通過該工藝，甜味劑可以在溫和條件（大氣壓和環(huán)境溫度）下以高產(chǎn)率生產(chǎn)，不含有害化學(xué)物質(zhì)。一旦微生物合成了所需的糖醇，就可以通過高效...

溫度的變化會(huì)對色譜分析方法的重現(xiàn)性和色譜柱的壽命產(chǎn)生重大影響。但為什么會(huì)這樣？恒譜生在以下的內(nèi)容將會(huì)為您介紹。一、再現(xiàn)性隨著溫度的變化，液相色譜柱內(nèi)固定相和流動(dòng)相之間的熱力學(xué)會(huì)受到直接影響。在不同溫度下運(yùn)行方法可能會(huì)影響分析物容量因子(k)或分析物在色譜柱上的保留時(shí)間。在升高的溫度下，流動(dòng)相和分析物的動(dòng)能都會(huì)增加。分析物動(dòng)能的增加將導(dǎo)致它們更強(qiáng)烈地移動(dòng)和振動(dòng)，并將破壞分子間結(jié)合，即分析物和固定相之間的分離和保留機(jī)制。很多時(shí)候，這會(huì)導(dǎo)致所有分析物更快地從液相色譜柱中流出，從而縮...

緩沖液是一種含有弱酸及其共軛堿（或弱堿及其共軛酸）的水溶液。加入少量強(qiáng)酸或強(qiáng)堿后，緩沖溶液的pH值變化很小，當(dāng)小的環(huán)境因素發(fā)生變化時(shí)，有助于抵消分析方法中的條件變化。緩沖溶液用于將pH值保持在幾乎恒定的值。由于這種弱酸(HA)與其共軛堿之間存在平衡，它們對pH變化具有抵抗力。一、hplc緩沖液的工作原理當(dāng)一些強(qiáng)酸（更多的H+）被添加到弱酸及其共軛堿的平衡混合物中時(shí)，根據(jù)LeChatelier原理，平衡向左移動(dòng)。類似地，如果將強(qiáng)堿添加到混合物中，則氫離子濃度降低的量小于所添加堿...