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液相色譜的保護(hù)柱,顧名思義是用來過濾樣品和流動(dòng)相中的雜質(zhì),保護(hù)色譜柱,延長色譜柱的使用壽命的安裝位置通常在進(jìn)樣器之后,色譜柱前端。保護(hù)柱再選擇時(shí)分兩種:一種是獨(dú)立式卡套保護(hù)柱??ㄌ變?nèi)放有柱芯,柱芯內(nèi)含有填料,柱芯可以更換,而柱芯是根據(jù)色譜柱的類型來選擇的。另一種是一體化卡套保護(hù)柱。這是一種特殊的色譜分析柱構(gòu)造,色譜柱前端是一體化的,可以直接打開保護(hù)柱卡套。這種保護(hù)柱帶來的死體積較小,但是分析柱選擇時(shí)成本較普通分析柱更高。值得注意的地方,保護(hù)柱的柱芯除了需要根據(jù)色譜柱的類型進(jìn)行...
初次將UHPLC用于小分子分離時(shí),能得到很好的峰形,但是蛋白質(zhì)峰的分離幾乎沒有那么好,因此通常不可能顯著縮短運(yùn)行時(shí)間。然而,最近對(duì)蛋白質(zhì)進(jìn)一步改進(jìn)讓UHPLC可以提供更好的分離度和更短的運(yùn)行時(shí)間。雖然UHPLC不能讓科學(xué)家始終看到蛋白質(zhì)之間的所有差異,但它可以讓他們看到一些差異——例如,在大體形態(tài)、二硫化物異構(gòu)體、脫氨基作用和蛋白質(zhì)折疊方面。蛋白質(zhì)研究人員使用不同的色譜模式來實(shí)現(xiàn)這一目標(biāo),例如反相色譜(RPC)、離子交換色譜(IEX)和尺寸排阻(SEC)色譜。為了成功分離出蛋...
UHPLC是一種專門的液相色譜方法,與HPLC相比,它運(yùn)行速度更快、分辨率更好并且使用的溶劑更少。UHPLC通過使用填充較小顆粒(通常直徑小于2µm)的較小色譜柱來實(shí)現(xiàn)這一點(diǎn)。生物化學(xué)、細(xì)胞和分子生物學(xué)、臨床醫(yī)學(xué)和許多其他領(lǐng)域的研究人員依靠UHPLC從混合物中分離不同類型的分子——無論這些分子是蛋白質(zhì)、肽、代謝物、藥物化合物還是其他化學(xué)物質(zhì)。盡管UHPLC的性能明顯更好,但它并不總是*。在您考慮改用UHPLC時(shí),恒譜生將幫助您區(qū)分重要和不重要的內(nèi)容。為什么選擇UH...
C18色譜柱由柱管、壓帽、卡套(密封環(huán))、篩板(濾片)、接頭、螺絲等組成。柱管多用不銹鋼制成,壓力不高于70kg/cm2時(shí),也可采用厚壁玻璃或石英管,管內(nèi)壁要求有很高的光潔度。為提高柱效,減小管壁效應(yīng),不銹鋼柱內(nèi)壁多經(jīng)過拋光。也有人在不銹鋼柱內(nèi)壁涂敷氟塑料以提高內(nèi)壁的光潔度,其效果與拋光相同。還有使用熔融硅或玻璃襯里的,用于細(xì)管柱。色譜柱兩端的柱接頭內(nèi)裝有篩板,是燒結(jié)不銹鋼或鈦合金,孔徑0.2~20μm(5~10&μm),取決于填料粒度,目的是防止填料漏出。C18色譜柱按用途...
分析保護(hù)柱是液相色譜分析中重要的色譜耗材,使用保護(hù)柱可大大降低分析柱受污染的程度,延長分析柱使用壽命。分析保護(hù)柱使用注意事項(xiàng):1.獨(dú)立式保護(hù)柱與分析柱連接時(shí),連接管路盡可能短,且接口切面平滑,盡量減少死體積以降低柱外展寬效應(yīng)。2.卡套式保護(hù)柱一般未標(biāo)注液流方向,使用時(shí)最好自行標(biāo)注,并按照標(biāo)注方向來使用,以免正反向使用后,截留的雜質(zhì)污染分析柱。3.直接填裝的短柱型分析保護(hù)柱,出現(xiàn)柱壓升高或峰型變差時(shí),可不接分析柱進(jìn)行反向清洗,清洗溶劑可參考分析柱清洗溶劑。4.卡套式保護(hù)柱,柱芯...
引入HPLC色譜柱的樣品通常多種多樣且復(fù)雜,這些樣品可能含有許多與HPLC條件不兼容的成分。在沒有適當(dāng)?shù)臉悠分苽浠驑悠奉A(yù)處理的情況下注入此類樣品可能會(huì)導(dǎo)致色譜柱堵塞。比如殘留的蛋白質(zhì)和高疏水性化合物(如脂質(zhì))在反相分離過程中也可能不會(huì)*洗脫出來,它們往往會(huì)慢慢吸附到分析色譜柱上并引起問題。不兼容的樣品稀釋劑和流動(dòng)相也會(huì)導(dǎo)致堵塞問題。如果兩者不兼容,當(dāng)將樣品引入流動(dòng)相時(shí),如果稀釋劑與流動(dòng)相兩者對(duì)比極性太強(qiáng),通常會(huì)出現(xiàn)樣品沉淀。流動(dòng)相緩沖液通常用作HPLC中的流動(dòng)相,重要的是在使...