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反相色譜柱是我們應(yīng)用廣泛的色譜柱類型,反相色譜柱鍵合相主要包括:C18、C8、C4、Phenyl、aQ、等。對于以上色譜柱,我們在使用及維護的時候可以按照同樣的操作方式:1、在條件允許情況下,在使用前最好對新色譜柱按照說明書方法進行柱效測試。以確保色譜柱的正常。2、所有硅膠基質(zhì)色譜柱使用溫度應(yīng)低于60℃。3、樣品最好將樣品溶解在流動相或極性相近的溶劑中。如果使用梯度洗脫,則需要將樣品溶解在初始流動相或極性相近的溶劑中。樣品溶液不應(yīng)含有任何顆粒物,最好使用0.5μm或更小粒徑的...
現(xiàn)代高效液相色譜中,分離效果好壞很大程度上取決于色譜填料的選擇。但是色譜填料的選擇范圍很寬,要做合適的選擇,首先必須對此有一定的認識和了解。下面將對幾種常見的色譜柱填料極其各種的性能做各一個簡要的介紹。(1)硅膠填料硅膠填料主要應(yīng)用正相色譜及反相色譜柱中,正相色譜用的固定相通常為硅膠(Silica),以及其他具有極性官能團,如胺基團(NH2,APS)和氰基團(CN,CPS)的鍵合相填料。由于硅膠表面的硅羥基(SiOH)或其他團的極性較強,因此,分離的次序是依據(jù)樣品中的各組份的...
使用高效液相色譜(HPLC)來分析樣品被廣泛應(yīng)用于藥物組分分析、食品添加劑測定和環(huán)境樣品測試等。由于液相色譜柱是許多實驗室的核心設(shè)備且成本高昂,因此保護柱子免受損壞是延長色譜柱壽命和降低成本的首要考慮因素。維護良好的色譜柱還能產(chǎn)生一致且準確的數(shù)據(jù),為可靠的分析結(jié)果提供支持。如何提高分析色譜柱性能?色譜柱性能取決于多種因素,包括樣品特性、不溶性顆粒的存在以及使用后的清潔維護等。但是在使用過程中,并不是所有實驗條件都是理想條件。例如,某些樣品具有苛刻但必要的pH條件。因此,對于液...
液相色譜儀除了日常維護保養(yǎng)外,使用高純度溶劑不僅能保護液相系統(tǒng),也能增加結(jié)果的可靠性。HPLC級表示化學(xué)試劑的純度,是可在高效液相色譜中使用的試劑的純度,制備色譜法、平行分析或梯度分析需要使用到不同的HPLC級試劑。樣品在注入液相系統(tǒng)前,必須選擇一種合適的HPLC溶劑。在反相高效液相色譜中,當樣品溶劑與流動相的洗脫強度有差異,尤其是前者的洗脫強度較強時,就會產(chǎn)生峰的變形及柱效的降低。解決該問題有效的方法是使用流動相作為溶劑溶解樣品,這樣既可以避免樣品溶劑和流動相之間任何強度或...
樣品過濾是制備色譜分析樣品的關(guān)鍵步驟。實驗前如果不過濾樣品會導(dǎo)致色譜柱篩板堵塞等問題,從而導(dǎo)致背壓增高和色譜柱性能下降。最終,這會增加花在色譜儀故障排除和維護上的時間,浪費時間也增加科研人員的工作量。對于大多數(shù)類型的樣品,過濾處理相對比較簡單。在進樣前用溶劑進樣口過濾器對流動相過濾。這一步也非常重要,用色譜過濾頭可有效濾除流動相中的固體顆粒雜質(zhì);未經(jīng)過濾的溶劑或溶劑瓶中生長的微生物都會降低液相色譜柱和泵的性能。使用一段時間后需要定期清洗或更換溶劑入口濾頭。在食品和飲料行業(yè)分析...
HPLC一般指高效液相色譜,是一種多功能的分析方法,可對各種化合物進行分離和定量。它廣泛應(yīng)用于生命科學(xué)領(lǐng)域的應(yīng)用、藥物分析、食品分析、環(huán)境監(jiān)測、精細化工產(chǎn)品分析等眾多領(lǐng)域。HPLC的技術(shù)都具有基本原理,比如樣品引入,色譜柱中樣品組分的分離以及最后使用多種檢測技術(shù)進行檢測。想了解制備型HPLC要先對分析型HPLC進行初步研究,兩種技術(shù)之間的基本區(qū)別是操作規(guī)模,下面將重點介紹區(qū)別:明確分析的目標在進行分析之前,你應(yīng)該對分析目標有清楚的了解。你是希望獲得有關(guān)樣品成分純度的信息然后進...