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液相色譜系統(tǒng)是一個(gè)封閉的系統(tǒng)，從最開始的溶劑瓶一直到最后的廢液瓶，期間是保持*封閉的，流動(dòng)相在系統(tǒng)內(nèi)應(yīng)該是流動(dòng)不會(huì)發(fā)生漏液或者外部氣體進(jìn)入系統(tǒng)內(nèi)部發(fā)生漏氣的現(xiàn)象。但是這是理想的液相系統(tǒng)，現(xiàn)實(shí)操作中還是會(huì)發(fā)生一些小問題、小故障從而產(chǎn)生漏液或者漏氣的現(xiàn)象。漏液的原因主要有以下幾種情況：（1）接頭處漏液一般是色譜柱接頭處漏液，可能是由于接頭損壞、松動(dòng)、接口不匹配等情況而造成漏液。這時(shí)只要檢查接頭是什么問題，就差不多了。接口損壞可以替換新的，松動(dòng)就擰緊，如果是不匹配的問題，最好是用色...

提起生物堿，制藥的小伙伴肯定不陌生，它是中草藥中最重要也*有價(jià)值的生物活性成分之一。生物堿可分為59種，它們的結(jié)構(gòu)比較復(fù)雜，用傳統(tǒng)的方法分離效果不佳。高效液相色譜法還沒出現(xiàn)之前，對(duì)于生物堿的分離純化一直是學(xué)者們的難題。但是，即使使用液相色譜法分離，也會(huì)存在許多問題。堿性化合物分析中顯著的難題是峰形拖尾，而且堿性越強(qiáng)的時(shí)候，就越容易發(fā)生拖尾現(xiàn)象。恒譜生和你一起探討一下峰拖尾該如何避免！1、流動(dòng)相調(diào)節(jié)流動(dòng)相也可以改善峰拖尾的現(xiàn)象，前期在選擇流動(dòng)相的時(shí)候，要考慮流動(dòng)相pH值的范圍。...

液相色譜柱是液相色譜分析的核心，對(duì)于填料一直是色譜界研究的熱門項(xiàng)目。液相色譜柱的研究可謂是中原逐鹿，競(jìng)爭十分激烈。液相色譜柱的發(fā)展都?xì)v經(jīng)了哪些變化呢？首先是柱子的柱體。從材質(zhì)上，一開始采用玻璃制作，但是我們都知道玻璃這種東西十分不耐壓，液相色譜分析的運(yùn)行壓力越來越高，甚至現(xiàn)在還有超高壓液相色譜，用玻璃的柱體是十分不合適的。現(xiàn)在的液相色譜柱的柱管幾乎都是用金屬制作了。通常采用不銹鋼材質(zhì)，具有高強(qiáng)度、高硬度的同時(shí)，不易生銹腐蝕、適用的溫度廣泛。恒譜生的液相色譜柱柱管就是采用不銹鋼...

誤區(qū)1：HPLC柱不可以反沖這是不正確的。通常情況下液相色譜柱所設(shè)計(jì)的耐壓值是遠(yuǎn)高于最大操作壓力的。換柱時(shí)反沖可以清洗柱頭一些具有強(qiáng)吸附性質(zhì)的物質(zhì)，我們沖洗出這些殘留物質(zhì)也是為了防止壓力增大。但是如果你購買的色譜柱在柱頭使用了大粒度的填料，這時(shí)你反沖會(huì)沖出這一部分填料。因此你要先檢查一下自己使用的液相色譜柱再選擇是否反沖。誤區(qū)2：所有的C18（L1）色譜柱都是一樣的這是不正確的。在早期的HPLC體系中，C18是僅有的反向色譜的鍵合固定相，因此C18就作為了反向色譜柱的標(biāo)準(zhǔn)。但...

色譜填料技術(shù)又稱層析分離技術(shù)或色層分離技術(shù)，是一種分離復(fù)雜混合物中各個(gè)組分的有效方法。它是利用不同物質(zhì)在由固定相和流動(dòng)相構(gòu)成的體系中具有不同的分配系數(shù)，當(dāng)兩相作相對(duì)運(yùn)動(dòng)時(shí)，這些物質(zhì)隨流動(dòng)相一起運(yùn)動(dòng)，并在兩相間進(jìn)行反復(fù)多次的分配，從而使各物質(zhì)達(dá)到分離。如今，色譜技術(shù)廣泛應(yīng)用于工業(yè)中尤其是食品藥品行業(yè)，高效液相色譜也逐漸成為了食品藥品實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)部門的標(biāo)配。在制藥行業(yè)，色譜層析制備柱也成了抗體、糖蛋白、抗生素等產(chǎn)品主要的生產(chǎn)設(shè)備。色譜填料的選擇要點(diǎn)有哪些呢？一、硅膠基質(zhì)填料硅膠是H...

經(jīng)常做蛋白質(zhì)純化分離實(shí)驗(yàn)的色譜工作者，對(duì)于疏水色譜（Hydrophobicinteractionchromatography，簡寫HIC）肯定不陌生，血清蛋白、膜結(jié)合蛋白、核蛋白、受體、重組蛋白等化合物純化都需要用HIC色譜法。HIC在是利用樣品分子與固定相的疏水力作用的不同，用流動(dòng)相洗脫時(shí)，各組分遷移速度不同而達(dá)到分離的目的。疏水相互作用色譜法具有對(duì)蛋白質(zhì)的回收率高，蛋白質(zhì)不失活，蛋白質(zhì)變性可能性小等優(yōu)點(diǎn)。疏水作用色譜固定相的非極性比較弱，流動(dòng)相多采用高濃度鹽緩沖液進(jìn)行梯度...