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在高效液相分析檢測樣品的過程中,色譜柱會受到來自于樣品及色譜系統(tǒng)的污染,從而導(dǎo)致色譜柱耐用性差、壽命縮短。來自于色譜系統(tǒng)的污染主要指,HPLC儀器系統(tǒng)中部件磨損而產(chǎn)生的固體顆粒,以及流動相系統(tǒng)過濾不*殘留的固體顆粒。來自于樣品的污染主要指,未*溶解的樣品或者已*溶解的樣品進入色譜系統(tǒng)中,由于樣品溶劑和流動相溶劑對樣品溶解存在的溶解度差異,導(dǎo)致沉淀析出污染系統(tǒng)。特別是對于中藥、天然產(chǎn)物、合成中間體及生物藥品的檢測,因基質(zhì)的復(fù)雜性,色譜柱受污染的情況會更加嚴重。污染會導(dǎo)致色譜系統(tǒng)...
番茄果實的糖分和有機酸含量高度依賴于發(fā)育階段和成熟度。在成熟過程中,糖的總量可以增加到大約4%,其中葡萄糖主要存在于未成熟的綠色水果中,而*成熟的紅色水果通常含有比葡萄糖略多的果糖。隨著成熟后的成熟度的逐漸增加,糖含量會有所下降。有機酸的含量也受到發(fā)育控制,在番茄的所有階段中,檸檬酸是主要的有機酸,但未成熟的綠色西紅柿可能含有大量的蘋果酸,而其在成熟果實中的含量是相對比較低的。一般上講,糖是通過還原銅或銀離子的能力進行檢測分析的。但是這些方法都比較費時費力并且只能粗略區(qū)分還原...
c18反相色譜柱具有硅膠和聚苯乙烯色譜柱二者的優(yōu)點,并且摒棄了這兩種色譜柱的缺點。以乙烯醇共聚物為基質(zhì)的色譜柱,即使其載炭量很高也能保持表面的濕潤。多孔結(jié)構(gòu)具有足夠大的平均孔徑,對小分子化合物、多肽和小分子蛋白能夠產(chǎn)生理想的分離效果。在有機溶劑比例較高的流動相中,該柱具有與硅膠基質(zhì)色譜柱相同的柱效,但在堿性緩沖溶液為流動相條件下,其分離效率則超過硅膠色譜柱。顯著的特點之一是基質(zhì)被烷基化的填料的洗脫順序,其保留能力與碳鏈長度成正比。c18反相色譜柱的活化步驟:1、應(yīng)先使用20倍...
液相色譜保護柱的正確使用和維護十分重要,稍有不慎就會降低柱效、縮短使用壽命甚至損壞。在色譜操作過程中,需要注意下列問題,以維護色譜柱。①避免壓力和溫度的急劇變化及任何機械震動。溫度的突然變化或者使色譜柱從高處掉下都會影響柱內(nèi)的填充狀況;柱壓的突然升高或降低也會沖動柱內(nèi)填料,因此在調(diào)節(jié)流速時應(yīng)該緩慢進行,在閥進樣時閥的轉(zhuǎn)動不能過緩(如前所述)。②應(yīng)逐漸改變?nèi)軇┑慕M成,特別是反相色譜中,不應(yīng)直接從有機溶劑改變?yōu)槿渴撬?,反之亦然。③一般說來液相色譜保護柱不能反沖,只有生產(chǎn)者指明該...
氣相色譜法和高效液相色譜法都是在學(xué)術(shù)和工業(yè)實驗室中廣受歡迎的分離分析技術(shù)。高效液相色譜法在制藥、食品、醫(yī)療、生命科學(xué)等領(lǐng)域居于重要的地位;氣相色譜是分離和鑒定低分子量氣體或揮發(fā)性液體的理想技術(shù),它在工業(yè)、農(nóng)業(yè)、國防、建設(shè)、科學(xué)研究中都得到了廣泛應(yīng)用?,F(xiàn)在在您腦海中是否浮現(xiàn)出這樣一個問題:HPLC和GC到底有何不同,以及哪些因素決定了兩者的適用性?下面就由恒譜生為您解答心中的疑慮吧。HPLC指的是高效液相色譜,而GC指的是氣相色譜,HPLC和GC之間的主要區(qū)別在于:HPLC使用...
ODS填料的粒度主要影響填充柱的兩個參數(shù),即柱效和背壓。粒度越小,其表面積越大,填充柱的柱效超高;然而粒度越小,柱壓越大,柱壓的增加限制了粒度小于3pm的ODS填料應(yīng)用。在相同選擇性條件下,提高柱效可提高分離度,但不是因素。如果固定相選擇是正確,但是分離度不夠,那么選用更小粒度的ODS填料是很有用的。3umODS填料填充柱的柱效比相同條件下的5pmODS填料的柱效提高近30%;然而,3um的色譜柱的背壓卻是5um的2倍。與此同時,柱效提高意味著在相同條件下可以選用更短的色譜柱...